目的研究一种简单、高效、实用并且稳定的SD大鼠肝脏原代枯否细胞(KCs)的提取及培养方法。
方法选择体质量200 g左右的健康SD雄性大鼠,采用0.05%IV型胶原酶在体原位灌注法结合剪碎法,37℃水浴振荡20 min,经30%和60%Percoll密度梯度离心后,再经40%Percoll离心及贴壁法纯化提取KCs。
倒置显微镜下观察细胞形态,并用台盼蓝染色实验鉴定细胞活力,吞墨实验观察细胞吞噬功能及流式细胞术鉴定细胞纯度。
结果每只大鼠平均肝脏KCs的获得量为(1.00±0.20)×107(n=20),细胞活力为(92.34±0.15)%,细胞纯度均在(93.56±0.24)%。
结论改良的SD大鼠肝脏KCs提取方法操作简单,效果可靠,可为今后KCs的研究奠定基础。
